ПЦР анализ в диагностике различных инфекций, что это такое и как подготовится к анализу ПЦР

Инновационным методом диагностики, который позволяет выявлять разные инфекции, скрытые и наследственные заболевания человека, является пцр анализ: что это такое от того и не знают некоторые, кому он показан по тем или иным причинам.

Анализ пцр принадлежит к числу современных способов молекулярной биологии, где аббревиатура пцр обозначает буквально следующее — полимеразной цепной реакции. Итак, что это такое — пцр анализы, далее будет освещено подробнее.

Сущность нового молекулярного метода

Посредством метода пцр стараются добиться увеличения незначительной концентрации некоторых сегментов нуклеиновой кислоты из отобранной порции био материала (или пробы). Основой исследования является избирательное многоразовое копирование (амплификация) отрезка ДНК посредством ферментов в условиях медицинской лаборатории.

Открытие полимеразной цепной реакции принадлежит Кэри Мюлису (83 г), благодаря чему химик заработал благодарность в виде Нобелевской премии (93 г).

В ходе исследования био материала методом пцр применяют особую установку — амплификатор. В современном оборудовании предусмотрена возможность установления специальной настройки для нагревания и остуживания пробирок во избежание появления ошибочных данных диагностики.

В ходе проведения исследования последовательно сменяют три стадии — денатурацию, отжиг, элонгацию. При этом каждая включает 25-30 повторов.

Достоинства инновационной диагностики

Проведение диагностики на выявление инфекционных заболеваний по методу пцр достаточно востребовано в современном обществе. Плюсами такого обследования является:

1. Поиск возбудителя инфекции в изъятой и приумноженной порции материала. Результат обследования позволяет увидеть наличие или отсутствие РНК/ДНК возбудителя заболевания.
2. Почти исключаются ложные и не точные реакции.
3. Метод пцр является высокочувствительным. Иными словами данный анализ позволяет увидеть даже клетки возбудителя инфекции, находящиеся в единственном числе.
4. Результат на латентную форму возбудителя бывает готов спустя 4 ч с момента проведения обследования.

Можно определить инфекционных возбудителей и без наличествующей симптоматики заболевания. Кроме этого пцр анализ проводят и по выздоровлении после перенесенного инфекционного либо вирусного заболевания.

[attention type=yellow]Сейчас методы пцр диагностики развиваются быстрыми темпами, находясь в постоянном усовершенствовании. Возникают некоторые подвиды обследования.[/attention]

Основа медицинской методики

Анализ пцр предназначен для проведения исключительно в стенах лаборатории. Чтобы выполнить его условия, требуется увеличить в несколько раз строение РНК/ДНК человека. При этом должно образоваться столько РНК/ДНК, сколько требуется для проведения визуальной оценки.

Во время процедуры создается копия отрезка РНК/ДНК, отбираемого по заданным условиям. Для этого ведется целая база данных, по которой сличают строение разных инфекционных составляющих. ПЦР анализ позволяет не только распознать возбудителя, но и провести его количественную оценку.

 

Области применения методики

Данный вид диагностики используется разными областями медицины:

•  с его помощью можно проводить обследования на предмет идентификации генетического материала человека — волос, крови или слюны;
•  взятие крови для пцр анализа бывает необходимо в случае генотипирования (к примеру, для выяснения индивидуальной генетической реакции на лекарство);
•  метод помогает установить родственные зависимости человека, то есть определить его корни;
•  наибольшую распространенность метод молекулярной ДНК и РНК диагностики получил в медицине для установления факта разных инфекционных патологий.

Подготовка перед анализом — залог безошибочной оценки био материала

Чтобы пцр анализ показал достоверный результат, необходимо правильно подготовиться к процедуре забора био материала. Важно придерживаться следующих рекомендаций:

1. Если необходимо сдать слюну, то от приема лекарств и гастрономических продуктов стоит воздержаться минимум за 4 часа до взятия материала. Результат будет точным, если перед взятием соскоба с внутренней поверхности щеки рот предварительно прополоскать чистой водой и выполнить легкие массирующие движения на коже, способствующие обильному слюноотделению.
2. Назначение урогенитального мазка у любого человека (и у мужчин и у женщин) предполагает соблюдение полового покоя на протяжении 3-х суток. За неделю до похода в лабораторию нельзя пользоваться любыми средствами интимной гигиены (свечами, гелями, мазями, кремами), спринцеваться. За пару недель необходимо исключить прием антибиотиков. У женщин в период менструации мазок не берут, это становится возможным лишь по прошествии 3 суток после остановки менструального кровотечения. Примерно за 3 ч до забора материала должен отмечаться последний эпизод мочеиспускания.
3. Сбор мочи можно выполнить предварительно дома. Перед этим проводят основательную гигиеническую очистку наружных половых органов. Уже после этого порцию мочи в объеме 50-60 мл собирают в специальный пластиковый контейнер. Женщинам запрещено сдавать мочу во время менструации. Важно следить за качеством и чистотой собираемого материала. Для чего мужчинам рекомендуется оттягивать кожную складку, а женщинам закрывать влагалище обычным гигиеническим тампоном.
4. Сдача спермы у мужчин предполагает половой покой на протяжении 3 суток. Кроме того медики настоятельно не рекомендуют в это время принимать процедуры, сопровождающиеся воздействием на тело высоких температур (будь то ванна с горячей водой или посещение сауны), употреблять спиртные напитки и кушать острые блюда.

[attention type=yellow]Воздержаться от мочеиспускания придется также на протяжении 3 часов до процедуры.[/attention]

Расшифровка показателей

Интерпретирует получившийся результат доктор, направивший на обследование.

Взять на руки бланк с анализом можно уже на следующий день, и в нем может быть отражено одно из двух возможных заключений:

•  отрицательный результат — является показателем того, что искомый возбудитель инфекции в изучаемой пробе не выявлен;
•  положительный результат — позволяет дать подтверждение, что у человека имеется РНК/ДНК возбудителя инфекции в организме.

При этом вполне допускается ситуация, когда при отсутствии внешних проявлений заболевания результат оказывается положительным. Такое возможно обычно либо в самом начале развития заболевания, либо при обыкновенном носительстве возбудителя инфекции. Если выявлено второе, то проведение лечебных мероприятий планируют не всегда. Ограничиваются тем, что предписывают регулярно посещать профильного специалиста. Например, это бывает в ситуации наличия инфекционных возбудителей:

•  папилломавируса;
•  герпеса, пр.

Нередко их находят в мазке из уретры, цервикса или в слюне.

При этом важно понимать, что риск заражения здорового человека инфекционным носителем имеется достаточно высокий, даже если болезнь не доставляет последнему неудобства. Необходимость проведения лечебной терапии и ее интенсивность в случае с положительным результатом определяет лечащий врач.

Расшифровка анализа пцр содержит и количественные характеристики. Ориентируясь на количественные показатели доктор определяет степень активности патологического процесса, корректирует стадию развития болезни. На основе аналитических данных из результата специалист ведет подборку лечебного препарата и определяется с нужной дозировкой лекарства.

Обследование беременных

Поскольку ЗППП представляют реальную угрозу развивающемуся плоду (вплоть до выкидыша, преждевременных родов и пороков развития) будущим роженицам назначают обследование на ранних сроках беременности, выполнить его нужно до 12 недель. Мазок на анализ берут специальной щеточкой из шеечного канала матки. Ни для женщины, ни для малыша процедура не представляет опасности. Данное комплексное исследование у беременных именуют ПЦР-6.

Обследование на скрытые патологии

При подозрении у человека на наличие ИППП ему предписывают обследоваться, для чего нужно сдать кровь на скрытые инфекции. Принимать скрытую (латентную) форму могут следующие возбудители:

• уреаплазмы;
• хламидии;
• гонококки;
• гарднереллы;
• микоплазмы и пр.

Обнаружению латентного характера заболевания ППП способствует популярный ныне комплексный анализ пцр 12. Для выполнения диагностики делают забор мазка из половых путей. Результаты бывают готовыми спустя 2 суток.

Диагностирование ВИЧ возбудителя

Достоверность методики при определении ВИЧ инфекции составляет 96-98%. В остальных 2-4% расшифровка содержит ложноположительный результат. Сдачу анализов пцр назначают лицам, чей результат ИФА оказался ложноотрицательным. Он может указывать на то, что у человека еще не сформировались в нужном количестве антитела к вирусу, и без существенного увеличения их выявление не представляется возможным.

Анализ назначают деткам первого года жизни, мамы которых имеют ВИЧ-положительный статус.

Данная молекулярная диагностика ценна тем, что позволяет выявить многие заболевания еще на стадии заражения. Метод пцр постоянно совершенствуется, благодаря чему стоимость его становится доступной для многих слоев населения.